正置荧光显微镜
发布人:高亚敏  发布时间:2021-07-26   浏览次数:1319
正置荧光显微镜   预约
管理人员高亚敏、黄婷妹
仪器型号
莱卡 LEICADM4000B
联系电话021-54341017放置位置

闵行校区生科院132

使用方向对外开放仪器状态
正常

      

仪器收费标准(院内、院外、校外): 

院内:30元/小时
院外:60元/小时
校外:120元/小时

    

技术参数:

◆BF(明场)聚光镜
◆配备了(Kohler)柯勒照明光线管理系统
◆机械机械式双数齿轮装置
手动操作的物镜换镜旋座:6X;M25线程
◆Fluo BF:
A(蓝光)激发:320-400,发射:425
L5(绿光)激发:440-520.发射:500-560
N21(红光)激发:500-580,发射大于590


仪器主要功能及应用:

1.主要功能
用于明场下染色标本的观察和拍照以及荧光染色标本和免疫杂交标本的观察和拍照。
2.应用
一般用于细胞结构和功能的观察及图像采集、细胞化学成分的观察及图像采集、明场显微功能及图像采集,可观察组织及细胞的固定切片、染色的明场病理观察及荧光记录,可获取高信噪比的荧光图像。


仪器使用步骤及注意事项:

1.操作步骤
一明场下的观察拍照:
a.首先,将物镜旋转到最小放大倍数的位置。 打开显微镜的电源开关(在显微镜右后面),所有电动显微镜配件将进行初始化操作。当初始化完成后,显微镜机架上的显示器将显示当前的显微镜设置。
b.打开电脑。双击桌面“Leica application suite v3.3.0”打开软件,在软件的“获取”/“摄像头”/“曝光条件”/下调节“饱和度”为1.5左右、“伽马” 为0.99左右、“增益”为1.0。
c. 按下 TL/IL 按钮,转换到透射光路(TL)。按下 BF可变功能键,选择 BF(明场)观察方法,显示屏显示为BF。
d. 在“获取”/“摄像头”“图像控制”/下,点击“在整个图像上的自动白平衡”。
e. 拉出显微镜左侧拉杆,放置一个待观察样本,将合适的物镜转入光路。利用聚焦旋钮(载物台的左侧有一个进行粗调和细调的聚焦转轮)对图像进行聚焦,利用 INT 功能键调节亮度或通过调节曝光时间改变亮度(其它参数一般不需要再调节)。
f. 点“获取”图像,拍照保存。
g.       结束后,关掉显微镜和电脑的电源开关。等冷却后,再将防尘罩罩上。
h.       测试完毕后,请认真填写登记表格。
二荧光照片的观察拍摄:
使用荧光时,请务必先预热荧光灯电源30分钟。
a.首先,将物镜旋转到最小放大倍数的位置。 打开显微镜的电源开关(在显微镜右后面),所有电动显微镜配件将进行初始化操作。当初始化完成后,显微镜机架上的显示器将显示当前的显微镜设置。
b.打开电脑。双击桌面“Leica application suite v3.3.0”打开软件,在软件的“获取”/“摄像头”/“曝光条件”/下调节“饱和度”为1.5左右、“伽马” >0.99、“增益”为1.0。
c. 按下 TL/IL 按钮,转换到透射光路(TL)。按下 BF可变功能键,选择 BF(明场)观察方法,显示屏显示为BF。
d. 拉出显微镜左侧拉杆,放置一个待观察样本,将合适的物镜转入光路。利用聚焦旋钮(载物台的左侧有一个进行粗调和细调的聚焦转轮)对图像进行聚焦,找到目标样本。
e. 按下 “TL/IL”按钮转换到荧光光路(FLUO)。当前在光路中的荧光滤块将显示在显示屏上。按下“SHUTTER”可变功能键,关闭反射挂光遮光器以防样本淬灭,显示器显示为图标: ;按下可变功能键“CHANGE CUBE”选择荧光滤块。利用聚焦轮聚焦图像,并且使用“INT” 键来调节照明度或通过调节曝光时间改变亮度。
f. 点“获取”图像,拍照保存。
g.  结束后,关掉显微镜和电脑的电源开关。等冷却后,再将防尘罩罩上。荧光激发器的电源开关须在开启30分钟之后才能关闭。
2.注意事项
a. 需要使用荧光时,请务必预热荧光灯电源30分钟。应一次把全部玻片观察完毕,勿中途切断电源,否则须待冷却后(约30分钟)才能再开电源。最少开机30分钟才可关机,以免缩短灯泡寿命。
b. 荧光色素于普通光线照射下易消失,故未观察之标本宜置不透光盒内储存于冰箱(4~5℃)。而在荧光显微镜之紫外线照射下亦易使荧光消失,故照像宜从速。