双道荧光分析仪
发布人:汤玉  发布时间:2023-08-17   浏览次数:373

双道荧光分析仪       预约

管理人员

高亚敏

仪器型号

WALZ/GERMAN 

DUAL-PAM-100

联系电话

021-54836395

放置位置

闵行校区生物馆132

使用方向

对外开放

仪器状态

正常

       

仪器收费标准(院内、院外、校外):   

院内:30元/小时

院外:100元/小时

校外:200元/小时 


技术参数:

◆ 荧光测量光源(F ML):蓝光LED 460 nm

◆ P700测量光源(P ML):双波长LED,830 nm和875 nm

◆ 远红光源(FR):LED,720 nm

◆ 光化光源:AL:红色LED,635 nm,最大连续光强3000 μmol.m-2s-1 PAR;BL:蓝色LED460 nm,最大连续光强1100 μmol.m-2 s-1 PAR

◆ 单周转饱和闪光(ST):红色LED 635 nm,最大闪光强度200000 μmol m-2 s-1PAR,5 – 50 s可调

◆ 多周转饱和闪光(MT):红色LED 635 nm,最大闪光强度200000 μmol m-2 s-1PAR,1 – 1000 ms可调

◆ P515/535激发光源:8个带干涉滤光片的白光LED,其中3个带550 nm干涉滤光片、4 个带520 nm干涉滤光片、1个带535 nm干涉滤光片,分别提供550 nm、520 nm和 535 nm的光

◆ P515/535检测器:带特制脉冲信号放大器的PIN-光电二极管,1个带有5 mm蓝-绿滤光片


仪器主要功能及应用:

主要功能

◆ 单独或同步测量叶绿素荧光和P700

◆ 可测荧光诱导曲线的快速上升动力学O-I-D-P相和O-J-I-P相

◆ 可测荧光诱导曲线的慢速下降动力学并进行淬灭分析

◆ 可测P700诱导动力学并计算Pm、 Pm’、 Y(I)、Y(ND)和Y(NA)等参数

◆ 可测两个光系统的光响应曲线和快速光曲线(RLC)

◆ 通过叶绿素荧光和P700的同步测量获知两个光系统的电子传递动力学、电子载体库的大小、围绕PSI的环式电子传递动力学等

◆ 通过测量P515/535信号变化测量跨膜质子动力势pmf及其组分跨膜质子梯度ΔpH和跨膜电位Δψ,“P515 Flux”信号能原位反映活体样品处于稳态的偶联电子和质子流动速率

应用        

◆ 用于光系统II与光系统I的电子传递过程的探讨及能量传递与耗散途径研究

◆ 测量活体叶绿素荧光和P700吸收变化来全面研究植物两个光系统的活性变化

◆ 分析植物和藻类样品的测量叶绿素荧光和P700吸收变化

◆ 通过特殊的激发检测单元还可以测量叶绿体或微藻的许多重要光合参数,

如跨膜质子梯度delta pH(通过9-AA荧光或吖啶黄荧光)、类囊体膜的电势(通过类胡萝卜素的差示吸收“P515”)


仪器使用步骤及注意事项:

1. 诱导曲线的测量

a. 将样品暗适应20 - 30 min。

b. 选择Settings选项,在Mode子选项中选择所需要测量的模式,单独测量PSII活性选择Fluo;单独测量PSI活性选择P700;

同时测量PSII和PSI活性选择Fluo+P700。Analysis Mode选择SP Analysis。其他版块不需更改。

c. 在Meas. Light子选项中选择测量光ML强度,一般不需要更改。

如单独测量P700或同时监测Fluo+P700时,需点击天平按钮进行调平,使得P700数值稳定且在0-0.2之间(可通过界面右下方P700数值边的上下键调节)。

d. 在Actinic Light子菜单中选择合适的光化光,高等植物普通测量一般选取100-300 μmol/m2/s左右光强即可,即8-1档中间选择。其他不需更改。

e. 查看或修改诱导曲线程序,在Slow Kinetics子选项中,修改AL Width可延长测量时间,

一般而言不需要更改,只有当样品跑完后没有走平时才需要增加时间。

f. 查看饱和脉冲SP,在Saturate Pulse菜单中查看饱和脉冲,一般不需更改。

g. 选择Slow Kinetics主菜单,在右侧Start按钮上方下拉菜单中将Manual改为Ind. Curve,点击Start开始程序测量。

h. 测量结束后,如需保存图形,点击上方软盘按钮保存Report,点击绿色箭头按钮导出Excel格式图形。

i. 选择Report主菜单,点击左上方软盘按钮保存Report,点击绿色箭头按钮导出Excel数据报告。


2. 测量Light Curve

a. 测量此曲线无需进行暗适应,将样品夹在叶片夹上,点击Light Curve主菜单(如测量PSI的Light Curve需要在Meas. Light中点击天平平衡),

  点击“Edit”按钮,跳出对话框,此对话框共有四列,

  第一列为步数,即总共可以跑20步;

  第二列为光强强度显示,即PAR值;

  第三列即光强梯度设置,一般选择从低到高的梯度;

  第四列为每一个梯度下光强照射的时间,一般选择相同的时间。 

b. 设置完光强和照射时间后,按OK确认,并点击Start按钮,开始快速光曲线测量。 

c. 测量结束后,数据会自动导入到report中;仪器提供了两个不同的拟合曲线EP和Plat et al.,自由选择任意一个,并点击Fit作出拟合图,点击计算器图标生成计算数值,并手动抄写下来。   

d. 测量结束后,如需保存图形,点击上方软盘按钮保存Report,点击绿色箭头按钮导出Excel格式图形。

e. 选择Report主菜单,点击左上方软盘按钮保存Report,点击绿色箭头按钮导出Excel数据报告。


3. 注意事项

a. 首次使用该仪器必须阅读说明书后在仪器负责人的监督下操作。

b. 如长时间不用机器,建议每个月拿出机器充电6小时,以保证电池的寿命。

c. 主机不能摔在地上,使用时需小心,强烈撞击会导致内部电路板脱落。

d. 使用仪器时尽量避免高温。

e. 禁止将比色杯放在藻类样品架上,然后再往里添加液体。

f. 仪器使用过程中禁止用眼睛直视探头的导光柱。