高效液相色谱 |
发布人:汤玉 发布时间:2021-05-07 浏览次数:651 |
仪器收费标准(院内、院外、校外): 院内:40元/小时 院外:100元/小时 校外:200元/小时 技术参数: ◆ 流量范围: 0.05 - 5.00 mL/min ,最高耐压 600 bar ◆ 流量精度: ≤ 0.07% RSD 或 0.02 min SD 取较大值 ◆ 延迟体积: 600 - 800 µL ◆ 进样范围: 0.1 - 100 µL ◆ 配备 DAD 检测器、荧光检测器、蒸发光散射检测器
主要功能 ◆ 高效液相色谱是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析 应用 蛋白质、肽、多糖等等各种生物物质的检测及分析 仪器使用步骤及注意事项: 1. 开机 a. 依次打开脱气机、泵、自动进样器、柱温箱和检测器开关,仪器开始自检。 b. 打开仪器控制电脑,双击化学工作站图标,打开软件,电脑自动与仪器 通讯。 在线软件用于仪器控制和方法设置,离线软件用于数据分析和图谱查看。 2. 仪器准备 a. 排气。配制流动相,用0.45 µm滤膜过滤,将流动相管路插到液面以下。打开purge阀,设定流速为5 mL/min,启动泵, 分别purge A泵和B泵,每个泵purge 3 min。关闭purge阀。 b. 色谱柱安装和平衡。按流路方向安装色谱柱,用初始流动相比例平衡柱子15 - 30 min,直到基线稳定。 3. 方法编辑和数据采集 a. 方法编辑:调取已保存的方法或新建方法。需要设置参数包括进样体积、样品盘温度、流速、梯度、时间、选择需要用的检测器、设置相应参数、柱温箱温控开启、设置柱温。方法设置完成后保存。 b. 数据采集:单针进样时点击状态栏单个样品瓶图标,编辑单个样品信息,点击确定,开始数据采集;序列进样时点击状态栏联排样品瓶图标,编辑序列上样的样品信息,保存后点击开始,开始数据采集。 4. 图谱查看和数据分析 a. 打开离线软件,从“视图”菜单中,单击“数据分析”进入数据分析画面。 b. 图谱查看:从“文件”菜单选择“选择信号”,选中你的数据文件名进行图谱查看。 c. 色谱峰积分:自动积分-调整积分参数获得合适的色谱峰积分;手动积分-手动添加色谱峰起始和结束的位置,软件自动计算出峰面积,单击左边“√”图标,将积分参数存入方法。 5. 实验结束 a. 实验结束后,用梯度方法冲洗色谱柱,最终将色谱柱保存在80%乙腈或甲醇溶液中。如流动相有无机盐,则先用100%超纯水过度半小时,再用80%乙腈或甲醇冲洗色谱柱。 b. 关闭柱温箱控温和钨灯,退出化学工作站及其它窗口,关闭计算机。 c. 关闭液相色谱各模块开关。 6. 注意事项 a. 流动相和样品必须用0.45 μm 的滤膜抽滤,超声后才可以上机。 b. 注意样品柱的选取和维护,上机接柱时不可以接反。 c. 实验完毕务必将系统用一定比例的有机相冲洗干净才可以关机。 |