蛋白纯化仪   预约
	管理人员	汤玉	仪器型号	AKTApure 25L
	联系电话	021-54341003	放置位置	闵行校区生科院132-冷室
	使用方向	对外开放	仪器状态	正常

仪器收费标准（院内、院外、校外）： 

院内：20元/小时
院外：40元/小时

校外：100元/小时

技术参数：

◆ 系统泵流速：0.001 - 25 mL/min

◆ 压力范围：0 - 20 Mpa

◆ 流速准确度： ± 1.2%；流速精度：RSD < 0.5%

◆ 紫外检测器：使用 LED 单一紫外光源（ 280 nm ）检测

◆ 检测范围： -6 - +6 AU

◆ 电导检测器：检测范围 0.01 mS/cm - 999.9 mS/cm ；电导精确度： 0.01 mS/cm

◆ pH 检测器： pH 范围： 0 - 14 ；温度准确度：0.1 pH unit

◆ 用于多种生物分子的快速纯化，如蛋白质、多糖、肽类、寡核苷酸、核苷酸疫苗、病毒及天然小分子等

仪器主要功能及应用：

主要功能

◆ 用生物工程下游技术从混合物之当中分离纯化出所需要得目的蛋白质

应用

适用各种层析技术，专门分离和纯化各类生物分子，包括天然蛋白质，重组和融合蛋白质、肽、寡核酸、质粒、病毒、抗生素、生物碱等等，操作肽图等精确分析和小量制备应用

仪器使用步骤及注意事项:

1. 准备工作

a. 打开AKTA pure 开关，看指示灯，泵同步（泵内有注入液体的声音）。

b. 打开电脑:双击 Unicorn图标打开系统进入log on 界面，输入用户名Default，密码default，点ok 键，

出现提示对话框，继续点确定，进入系统。

c. 进入系统时会弹出三个界面：System Control 界面，Evaluation 界面和Administration 界面。其中

system Control界面为主操作窗口，所有的设置选项都是在该界面下完成，Evaluation 界面为结果数据

查看及处理窗口，Administration 界面为 Unicorn系统设置界面。

d. 洗泵。点击 pause暂停系统。把A1泵头从20%乙醇中取出，用去离子水冲洗，放入分子筛缓冲液中，在

system control界面下，点击manual - execute manual instructions - pumps-pump A wash，点开inlet，

选择A1-execute。用同样的方法洗B1泵。

2. 设置系统参数

a. 设柱压：Alarms - alarm system pressure - high alarm - 设置最高柱压 - Execute。

b. 设流速：Pumps - System flow - 设置 system flow（1 mL/min）- execute。

3. 柱子安装和平衡

a. 装柱。先拧开柱子上面，连上来自进样阀的线，边拧紧上面边拧松柱下面，在离子柱子下端出口连上转

接头，接上一根较短的先并连到检测器上（流出液体，滴满检测器上的连接口的洞里，再拧紧）。

b. 平衡柱子。按照所用柱子的平衡方法平衡柱子。

4. 设置系统及收集参数

a. 命名。先 end - Manual instructions ，点击 browse，弹出 select result name & location 界面，

点开文件夹“default Home”，找到文件夹“lab data”，点开，选择自己名字首字母缩写文件夹(已创建)，

在界面下方“name”指令框进行命名。

b. 设置参数。设置流速、柱压、紫外调零、收集体积（如有）。

5. 上样和收集

a. 冲洗 Loop 环。用注射器注射2倍Loop 体积的缓冲液清洗 Loop 环。

b. 把蛋白样品转移至注射器内，从进样口把样品注射入Loop 环内。

c. 点击 Fow path - injection valve，点开position - inject - execute，走2倍Loop 体积的缓冲液。

d. 等流穿峰出来后，点击 Flow path - injection valve -点开 position 选项- manual load - Execute，

调回 Load状态。

e. 洗脱目的蛋白。Pumps - Gradient target 50%，length 50 min（可调）- Execute，自离子柱上洗脱结合

的蛋白。

f. 收集目标蛋白。收集洗脱下来的蛋白样品，做好标记。

6. 实验结束

a. 平衡柱子。点击 pause，泵头用去离子水洗，放入20%的乙醇中continue - 洗泵平衡柱子。20%的乙醇

平衡柱子一般要两小时左右，盐离子浓度达到0%。

b. 收柱子。设流速为0.5 mL/min，先下离子柱下端，并用母接头封闭离子柱下端接口，封闭柱下面接口

的同时松柱上面的接头，拧上柱上面的螺母封闭柱上端接口，随后将进样阀的线接到检测器上。

c. 关闭系统。点击 End 关闭系统界面，关闭 AKTA pure 电源，关电脑。