蛋白液相色谱仪
发布人:余蔚明  发布时间:2021-07-14   浏览次数:55
蛋白液相色谱仪     预约
管理人员史书怡仪器型号

GE healthcare life science/ AKTA pure

联系电话021-62233727放置位置

中山北路校区理科大楼B1802

使用方向对外开放仪器状态
正常

      

仪器收费标准(院内、院外、校外):

院内:100元/小时

院外:200元/小时

校外:300元/小时 


技术参数:

◆ 精确的全自动微量柱塞泵,双泵四泵头,单泵流速0.001-25ml/min,双泵最大流速:≥ 50ml/min;具备恒压调速功能,自动根据压力调节流速输出,使压力保持稳定。流速重复性:条件:0.25–25 ml/min, < 3 MPa, 0.8–2 cP。流速准确度:±1.2%,流速精度:RSD<0.5%;

◆最大电导检测值:≥900ms/cm;

◆带温度检测器:温度范围:0 - 99C;温度准确度:± 1.5C 在 4C–45C 之间,精确反应温度变化。

◆紫外检测器:使用LED单一紫外光源(280nm)检测,无需预热,使用寿命长。检测范围:-6 到 +6 AU,线性:2%

◆光源和流动池分开设计,避免光源过热对样品的影响,测定准确度高。

◆自动进样阀:1个,自动切换上样、进样和冲洗三个状态。加配上样组件,可实现三种上样方式之间的转换而无需手动更改管线连接:样品泵上样到样品环或super loop;注射器上样到样品环或super loop;样品泵直接上样到层析柱。

◆出口阀组件:1个,可自动切换在不同位置收集不同体积的组分。其中一个位置与收集器相连,实现数目较多样品的收集,另外有一个位置为大体积收集出口, 最后一个位置接废液。

◆样品泵,精确的全自动微量柱塞泵,双泵四泵头,每个泵头都有独立除气阀。流速:0.001 to 50 ml/min。压力范围:0–10 MPa (100bar,1450 psi),具备恒压调速功能,自动根据压力调节流速输出,使压力保持稳定。

◆样品入口阀:1个,完全,自动,安全的选择7个样品上样.整合气泡感应器。

◆pH计阀:1个,pH计固定在阀门上,无需移动,即可实现pH计的储存或校正。阀门上同时连接反压阀,可选择pH计和反压阀两者同时使用、单一使用或都不用。

◆柱位选择阀: 使用旁路和反向洗脱自动清洗和提高洗脱浓度,整合有柱前、柱后压力传感器,精确检测压力,保护层析柱安全。可自动切换在Bypass和5个柱位间选择。

◆入口缓冲液切换阀:1个,在单个阀上可实现2个A缓冲液入口和2个B缓冲液入口的选择。实现不同缓冲液之间的转换。

◆组分收集器:可根据体积或峰自动收集:试管容量最多可达350管,收集范围从0.1ml-50ml;兼容3,8, 15 或50ml型号的收集管;具有滴感应器,防滴漏功能;耐受有机溶剂。最多可接2个组分收集器。

◆控制软件:软件控制平台可随时加减控制元件;完整OPC 协议支持;界面友好、智能编程、层析专家也可自行编写程序直接显示您熟悉的实验流程和每一步的实验条件、即可直接调用模板,删除添加步骤,也可自行修改每一步的参数;流路实时在现,实时监控和控制;内置上百种层析柱和凝胶的信息,从1ml的小柱到几百升的工业生产柱都符合FDA的标准。直接选择层析柱、智能编程,无需担心超过层析柱或填料的报警压;Watch功能保证每一次运行的成功。可直接Watch柱压差,确保恒压装柱。


仪器主要功能及应用:

主要功能

蛋白液相色谱仪是应生物分子的特性而设计成全惰性纯化系统,能有效的快速纯化蛋白、天然药物和抗生素等分子,可以实现简单的一体化操作,从而可以花最少的时间和精力而得到所需要的结果,快速纯化多种生物分子,如蛋白质、多糖、肽类、病毒及天然小分子(TCM)等,适合分离纯化活性物质。

应用

可广泛应用于分子生物学、生物化学、蛋白质组学及生物制药等研究领域。


仪器使用步骤及注意事项:

使用步骤

1、 开机

打开仪器的主电源,打开电脑电源。待仪器自检完毕(主机控制面板白灯常亮)。双击桌面上UNICORN图标,进入操作界面。

2、 准备工作溶液和样品

所有的工作溶液和样品必须经过0.45µm的滤膜过滤(样品也可高速离心后取上清使用)。缓冲液需在使用前用低频超声脱气10min。

3、 清洗及管道准备

首先将A1管道入口放入平衡缓冲液(binding buffer)中,将B1管道入口放入洗脱缓冲液(elution buffer)中,在system control窗口点击工具栏内的manual,选择 execute manual instructions→pump→pump A wash和pump B wash,选中A1和B1入口,点击execute。泵洗完成后自动停止。

4、 安装层析柱

在manual instructions里选择pump→system flow,输入流速1 ml/ml,insert;选择Alarms→alarm pre column pressure,设置high alarm(输入填料的耐受压力,可在填料说明书中查到),insert,execute。待Injection Valve的1号位管道流出溶液后,将管路接入柱子的上端,稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉接入管道,连上紫外流动池。

5、 开始纯化:

1)选择检测波长,Monitors→Wavelength→UV1, UV2, UV3 (可以只打开一个波长) 等待柱子平衡好了(观察UV、COND、pH的数值和变化趋势)就可以准备上样。此时将紫外调零,选择Monitors→auto zero UV,exectue。

2)用样品环上样:将样品吸进注射器,推掉气泡,从injectionValve的3号位推入, 推好后不要取下注射器。在manual instructions里选择flowpath→injection Valve→inject,execute。

3)用泵上样:将A2入口放入样品中,manual instructions里选择flowpath→A inlet→A2, insert, flowpath→injectmark, insert, execute待样品上完后,在manual instructions里选择flowpath→A inlet→A1,使用平衡缓冲液继续清洗柱子。

2),3)任选一种方式

4)洗脱:上样后用平衡缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。在manual instructions里选择pump→gradient,按照自己的工艺选择target B(100%)和length(10CV)。

5)设定收集:

固定体积收集:选择Fraction collection→Fractionation, 选择收集管tube type,输入每管收集体积,exectue。结束固定体积收集选择Fraction collection→Stop fractionation,exectue。

峰收集:选择Fraction collection→Peak fractionation Parameters→UV Level, 设定峰收集的参数,选择Fraction collection→Peak fractionation设定峰收集每管收集的体积,exectue。结束峰收集选择Fraction collection→Stop peak fractionation,exectue。

6、 清洗泵及卸下层析柱:

将A1和B1入口放入纯水中,启动pump wash功能冲洗A泵和B泵及整个管路。然后再将A1和B1入口放入20%乙醇中,同样操作让乙醇充满整个管路。给系统一个慢流速,设置系统保护压力,然后先拆柱子的下端接头,在滴水的状态下将堵头拧上。再拆柱子上端接头,拧上上端堵头。整个过程防止气泡进入层析柱。

7、 关闭电源:

    从软件任一窗口File命令栏中点击退出。关闭ÄKTA主机电源,关闭电脑电源。


注意事项

1、保持系统及组分收集器外部和内部的清洁。

2、使用过滤器和过滤缓冲液,最好使用脱气处理的缓冲液。

3、纯化运行期间在室温下使用缓冲液、系统和层析柱。

4、在上样前离心或过滤样品,除非使用可以处理粗样品的层析柱。

5、定期使用全方位系统清洗和清洁以获得整台仪器包括组分收集器在内的最佳性能。