激光共聚焦显微镜
发布人:余蔚明  发布时间:2021-07-14   浏览次数:114
激光共聚焦显微镜     预约
管理人员史书怡仪器型号

Nikon/ C2plus

联系电话021-62233727放置位置

中山北路校区理科大楼B1802

使用方向对外开放仪器状态
正常

      

仪器收费标准(院内、院外、校外):

院内:200元/小时

院外:400元/小时 

校外:500元/小时 


技术参数:

*1、主机:全电动研究级倒置显微镜,液晶显示状态、参数等信息,中间1.5倍光学放大,具有良好的稳定性能保证在长时间观察或拍摄中图像没有成像的偏移,多端口光路输出,主机左右出光口视野不低于25mm;

2、目镜筒:双目观察,带勃氏镜便于物镜对中调整,具有关闭功能;

3、 物镜转换器:电动6孔微分干涉物镜转换器,软件和遥控器可以设置并任意选择物镜,无需手动设置。

*4、集成式完美对焦系统:具有LED红外光,可在所需的Z轴平面处实现实时校正。可防止细胞长时间观察和添加试剂时所带来的焦点漂移。即使在使用高倍率、高数值孔径的物镜和时,仍能清晰聚焦图像。此外,在物镜转换器装置上集成对焦系统可节省空间,使主机扩展为多层结构时将不再受限。具有防水功能。

*5、物镜:25mm螺纹尺寸,齐焦距离60mm

5.1、 10倍平场复消色差物镜,数值孔径≥0.45,工作距离≥4.0mm;

5.2、 20倍平场复消色差物镜,数值孔径≥0.75,工作距离≥1.0mm;

5.3、 40倍平场复消色差物镜,数值孔径≥0.95,工作距离≥0.21mm,0.11-0.23 mm盖玻片校正;

5.4、 60倍平场复消色差水镜,数值孔径≥1.27,工作距离≥0.17mm,

5.5、 微分干涉模块:10X、20X、40X、60XW各对应一个模块,专用微分干涉起偏器、检偏器;

6、 目镜:10倍,2个目镜屈光度都可调整;

7、 功能:具有明场、微分干涉及荧光功能;明场、微分干涉及荧光可以同时打开同时工作,从而保证微分干涉和荧光叠加时没有像素漂移的问题;

8、 载物台:可编程高精度电动载物台。配多种适配器,可夹持玻片和多种规格的培养皿、96孔板等,样品台可用操作杆控制操作;重复精度±0.5um;行程:X±57mm,Y:±36.5mm,最大驱动速度25mm/秒;

9、  透射光照明:复眼照明,LED光源,寿命可达数万小时;

10、 聚光器:电动长工作距离七工位聚光器,数值孔径0.52;

*11、Z轴:自动Z轴控制,高精度自动Z轴马达,采用凸轮而非齿轮传动,10mm行程,最小调节增量0.01微米;

12、 电动荧光转盘:电动荧光滤块转换,高速荧光转换系统,内置快速荧光切换马达, 换时无震动;滤片块中配备具有光陷阱技术,在荧光拍摄及观察时可大大增强图像的反差效果;

13、 电动长效荧光:光闸电动控制,长寿命金属卤化物灯,寿命≥2000小时;

14、 荧光滤色块:荧光滤色块TRITC/FITC/DAPI各一块;

15、 触摸屏控制器:完全显示整个显微镜状态,全自动控制整个显微镜,如物镜转换、滤光片转换等。可以一键切换任意光路(如荧光、明场、微分干涉等),有记忆设置功能,可以一键切换不同用户设置状态,以方便不同用户实验的需要;

16、 附件:所有的电动部件都可以通过主机上的按键操作,也可以通过电脑操作,还可以通过触控屏遥控器操作;

17、 记忆功能:对不同倍数物镜,保持对样品齐焦和倍数记忆功能。

(二)、激光单元及检测器单元

*1.激光单元: 紧凑型免校正激光台,激光台配备四条激光(LD型405nm、LD型488nm、DPSS型561nm、LD型640nm),所有激光器都已预先安装校正,只需进行简单连接,内建AOTF装置可对每一激光进行单独的控制与调制,具备用于不同系统的可替换控制器,并直接整合在激光台内有效减少空间占用,输出光纤末端激光功率:15mW。

*2、检测器通道数:

2.1、 3个标准荧光探测通道;

2.2、 1个独立的光谱探测器; 

2.3、 1个透射光探测通道。  

3、扫描头: 像素大小2048*2048;

   扫描速度:标准模式≥2帧/秒(512*512),快速模式≥100帧/秒(512*32)

4、扫描模式:X-Y,XY旋转,变焦,ROI,XYZ,时间系列,多点,大图拼接。

5、针孔:圆形,6种尺寸

*6、视场数:在512X512像素,速度达≥2帧/秒情况下,视场数不小于18mm。                          

7、软件:

专用软件,实现对显微镜及图像采集等所有外部设备的集中控制,实现6D图像的采集、处理和分析。可进行动态图像、时间间隔、Z轴序列、多通道图像、多点图像、多维图像及AVI动态流的拍摄,并能对图像进行手动、自动的目标识别和分析,分析结果可方便导入Excel、Word及各种主流统计软件。可实现大图拼接、多通道合成、宏定义等高级图像分析功能,可进行钙离子、FRET等研究。


(三)活细胞在线培养系统:能精确控制温度、湿度及能观察多孔板及常用培养器皿。

(四)、附件

1、显微镜防震台   气垫式   一个 。

2、计算机工作站:HP服务器一套。不低于以下配置:

CPU:i7/内存16G/硬盘2T/4G独立显卡/32寸显示器


仪器主要功能及应用:

主要功能

观察标本、活细胞,进行定点光漂白实验,进行图像三维扫描成像。主要用来实现超高时空分辨的生物大分子动态分析。目前该平台可用于组织切片、细胞的荧光标记、三维图像重建分析研究;细胞生物物质、离子的定性、定量、定时和定位分布检测等。

应用

可应用于生物学,医学,纳米科学,神经学,肿瘤学等领域的研究。可对活细胞和组织或细胞切片进行连续扫描,可获得精细的细胞骨架、染色体、细胞器和细胞膜系统的三维图像。可完成细胞内离子荧光标记,单标记或多标记,检测细胞内如PH和钠、钙、镁等离子浓度的比率测定及动态变化。数据图像可及时输出或长期储存。


仪器使用步骤及注意事项:

使用步骤

1、开机:大体按照:电脑激光台(打开要用的激光按钮)卤素灯载物台显微镜控制器软件,荧光灯需要就打开,不需要不用打开

2、拍摄流程:打开软件Nikon confocal,ok进入软件操作界面,点eye port,看目镜聚焦,然后点eye port及Interlock解锁切换到激光光路L100,根据自己实验来设置参数和探测方法(DU4),然后点scan,重调Z轴找焦面,对通道进行HV和功率优化,停止scan,点击capture,完成一次拍摄。

3、图像保存:⑴数据保存:File,save as,保存原始数据文件格式.ND2;⑵图片保存:File,Inport/Export,Export ND document,在Export ND document 窗口中Channels,TIF compatibility Options(选择第二个或第三个),保存叠加图像时,在Export ND document 窗口中Channels勾选Insert Overlaps,再点击export

4、关机:Z轴降到500以下,物镜转到空挡,最后与开机完全相反顺序进行关机。


注意事项

1、放置样品时,确保样品的中心区域在物镜的正上方,且尽量要物镜在两个夹片中心区域,以免转换物镜时,撞坏物镜;

2、原则上所有的光源都非常忌讳频繁开关,会大大缩短其使用寿命。荧光灯、卤素灯:开机后不管是否使用,都最好半小时后再关闭;关机后至少等十五分钟再开机。激光:开机后不管是否使用,都最好一小时后后关闭;关机后至少等一小时再开机。 

3、明场卤素灯的功率值不能超过4,否则会导致温度过高烧坏光纤,影响明场成像; 

4、60倍和100倍物镜是油镜,滴油时注意只需沾一下,切勿多,滴了油,如果要转物镜,必须先将当前滴了油的物镜用石油醚清洗擦干净才能转换;

5、实验结束或者换样品转换镜头时必须按照以下程序进行操作:首先,取下样品,将物镜Z轴值降到500以下,然后,将载物台的载玻片拨至两端,最后再进行物镜的转换。