量化成像流式细胞仪     预约
	管理人员	史书怡	仪器型号	Merck Millipore/ Image Stream MarkII
	联系电话	021-62233727	放置位置	中山北路校区理科大楼B1802
	使用方向	对外开放	仪器状态	正常

仪器收费标准（院内、院外、校外）：

院内：300元/小时                

院外：500元/小时               

校外：600元/小时     

技术参数：

◆激光光源 ：配置 3 根激 光器 ：488nm 200 mW蓝光激光器642nm 150mW 红光激光器 785nm70 mW 暗视野激光器 

◆检测通道：6 个检测通道包括明视野,暗视,荧光检测通道 

◆图像采集：可在细胞或细菌悬浮状态下进行细胞或细菌成像 ，包括明视野 、暗视野和荧光通道图像 

◆荧光检测 灵敏度小于等于5 MESF 

仪器主要功能及应用：

主要功能

ImageStreamx Markll 成像流式细胞分析仪将流式细 胞术的统计学力量与荧光显微成像的形态学分析结合于 一身，能够对通过流动室的细胞或者细菌逐个采集图像 ， 并利用图像分析软件对每个细胞或细菌图像的形态学参 数进行量化分析 ，不仅可以提供基于流式分析的细胞群 的统计数据，还可以获得超过 100 种细胞形态学 、细胞 结构和亚细胞信号分布的量化成像信息 ，可广泛应用于 免疫学 、肿瘤学 、生物化学 、化学材料学 、干细胞 、病 原微生物、海洋学等多种学科的研究 。其独特应用包括 ： 形变、内吞、蛋白间相互作用、共定位研究等等。

应用

研究能够生产高端药物或者高价值产物的人工细胞 ，打破 目前使用普通细胞或者化学法难以生产目的产物的瓶颈。同时通过 计算机模拟和大数据分析 ，得到细胞或类细胞之间相亘作用的新机 制 ，为进一步探究人类致病机理以及纳米药物传递方式提供重要的 理论依据。

仪器使用步骤及注意事项:

使用步骤

1. 开机：打开 ImageStreamX MK II 主机和两个电脑的电源，电脑主机默认密码“is100”；双击 ISX 软件图标启动

2. 检查鞘液、清洗液等是否足够，将废液桶清空。单击软件界面右下方的“Start up”，仪器会自动冲洗管路、将鞘液装载到液流系统中，并自动对系统状态进行检测

3. 在“File”中选择“Load default template”或者已有模板，点击“Load”，在1.5 ml或者0.5 ml离心管中加入样品（每种染料都标记）。根据实验要求选择合适的流速和放大倍数，在“Illumination”界面中，打开本次实验要用的所有激光器、选择明场通道所在位置

4. 在“Plot”界面中，生成点图（dot plot）或者直方图（histogram）用于选择数据获取所需的细胞群体（如果是要选定单细胞，使用Area和Aspect Ratio散点图，圈定Aspect Ratio趋近于1、Area中等的密集细胞群）。调整激光机的功率使得荧光值最大，但又不处于过饱和状态（每种染料的Raw Max Pixel的范围为100-4000之间）

5. 在“acquisition parameters”中选择数据保存的文件名称、文件夹、想要获取的细胞群及细胞数（也可以选择保存所有细胞的数据）。点击获取数据；依次获取、保存所有样品的数据

6. 荧光补偿

1) 关闭785 nm激光器和Brightfield

2) 点击“Load”，将一个对照单阳性样本放到上样孔中

3) 获取细胞范围选择“All”， 设定要获取的细胞数、文件名（建议为荧光素名称）

4) 点击“Acquire”获取数据，获取数据的文件系统会自动添加“noBF”尾缀

5) 重复2)-4)步获取其他单阳性对照样品数据

7. 保存实验条件：点击“File”中的“save template”、保存本次实验条件；可以在做类似实验时，点击“File”中的“load template”、调取实验条件

8. 关闭系统：点击“Shutdown”，仪器自动清洗、关闭系统，此过程大概花费45 min

注意事项

1. 保持一定的使用频率，最好保证仪器每周运行；如没有实验，可以正常运行开机（Startup）、关机（Shutdown）一次；

2. 如长期不使用仪器（超过一周），再次使用时，在Startup之后，运行清洗消毒2-3 次后再做实验：点击Shutdown，取消“√”；上样时请注意打开管盖，否则会导致上样器损伤。