高效液相色谱仪
发布人:高亚敏  发布时间:2021-07-26   浏览次数:619
高效液相色谱仪   预约

管理人员汤玉、高亚敏仪器型号
依利特 EClassical 3100
联系电话021-54341017放置位置

闵行校区生科院132

使用方向对外开放仪器状态
正常

      

仪器收费标准(院内、院外、校外): 

院内:40元/小时

院外:100元/小时

校外:200元/小时

           

技术参数:

◆流量范围

0.001~10.000mL/min(设定步长0.001mL/min)

◆流量准确度

≤±0.2%(1.000mL/min,8.5MPa,水,室温)

◆流量稳定性

≤0.075%RSD(1.000mL/min,8.5MPa,水,室温)

◆最高工作压力

45MPa(0.001~5.000mL/min)

20MPa(5.001~10.000mL/min)

◆检测器配置:紫外检测器,波长范围190nm-700nm

◆全自动进样器

◆电源/功率

220V/180W



仪器主要功能及应用:

1.主要功能

高效液相色谱是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。

2.应用

蛋白质、肽、多糖等等各种生物物质的检测及分析


仪器使用步骤及注意事项:

1.操作步骤

a.   流动相的配制 

a.1.根据各药品项下规定的配制方法,配制流动相,用微孔滤膜(φ0.45μm)抽滤,有机溶剂(或混合溶剂)用油膜过滤,纯化水系溶液用水膜过滤。 

a.2. 脱气:配好的流动相用超声波清洗器超声排气泡,时间约10~20分钟。 

b.  开机 

b.1. 待电压稳定后,依次打开“高压输液泵”电源、检测器电源、工作站电源和电脑电源。 

b.2. 换上流动相(若流动相中含有酸或盐不能直接换上流动相,需要用10%甲醇水溶液运行30分钟后再换上流动相,若流动相中不含酸或盐则可以直接换上流动相),开始下列操作: 排空冲洗、调流速、调波长。 

    若连接泵头的吸液管中无液体填充或有大量气泡时,逆时针打开泵单元上的排空阀,用注射器抽取约20ml液体后,按“冲洗”键进行冲洗约2分钟至吸液管中没有气泡,再次按“冲洗”键停止冲洗,然后顺时针关闭排空阀。

若连接泵头的吸液管中有液体填充且无气泡,打开排空阀,按泵控制面板上的“冲洗”键冲洗2分钟后,再次按“冲洗”键停止冲洗,关闭排空阀。

调流速:根据检品要求调流速。方法:按泵单元控制面板上的“操作菜单”键一次,进入 P230Ⅱ高压恒流泵的“MENU1 BASIC OPERATION”功能状态,在该状态下通过按“△”或“▽”上、下移动键可以循环进入泵的流速、最高限压、最低限压设定界面,对相应值进行设定和修改。此时光标在要修改的参数处闪动,可以直接键入新的数值然后按“确认”键。按“△”或“▽”键选择 MENU1 中其它参数进行设定。设定完成后按两次“操作菜单”键即可返回初始界面。按“运行”键开始运行。若调节流速前显示的流速正好符合检品要求则无需调节流速。

调波长:根据检品要求调波长。方法:按检测器控制面板上的“操作菜单”键一次,屏幕显示 “MENU1”后按“△”或“▽”键进行波长设定,设定是按数字键后按 “确认”。若调节波长前显示的波长正好符合检品要求则无需调节波长。 

b.3. 打开电脑桌面上EC2006工作站图标 ,进入工作站界面,并进行系统配置验证。

b.4. 设置分析方法:根据检品所需设置分析方法(或直接调出本检品已保存的方法),点击“启动基线监测”图标后进行基线监测,待基线稳定后停止基线监测。

b.5. 进样:点击“启动数据采集”图标后,用仪器配备的进样器,吸取一定量的待检液,注入进样阀,快速扳动进样阀手柄,即开始启动数据采集。 

b.6分析结果: 等到所设的时间结束后自动分析。 

c.  实验完毕后的处理工作 

c.1.关闭检测器电源,实验完毕及时关闭检测器(便于保护检测器,甚至可延长检测器的寿命);

c.2.冲洗 

    在大的注射器上安上配备的冲洗头(白色的圆形配件)用10%甲醇水冲洗3~5次,再用纯甲醇冲洗2~3次即可,盖上红色的进样阀保护盖。 

c.3.色谱柱的冲洗 

(1)含盐的流动相的冲洗方法:每天操作结束后,先用含甲醇10%甲醇水溶液冲洗,时间约30分钟。再用纯甲醇冲洗,约30~60分钟(注:不能直接用有机溶剂冲洗,盐类易析出,堵塞色谱柱,造成色谱柱永久性损坏)。 

(2)不含盐的流动相的冲洗方法:每天操作结束后,先用原流动相冲洗约10~15分钟,纯甲醇冲洗,时间约20~30分钟。

c.4.根据提示依次关闭电脑上工作站软件的各个界面,最后关闭工作站,恒流泵和柱温箱电源(注意:关闭泵电源前先按“运行/停止”键一次,停止泵,待压力降到0时,再关闭泵的电源)。 


2.注意事项

流动相或单项溶剂需经过0.45μm的微孔滤膜过滤,以降低色谱柱受污染的程度,延长使用寿命。抽滤流动相或单项溶剂时,应注意滤膜的选择:抽滤纯水或纯水溶液时,选用水系滤膜,抽滤分析纯有机溶剂或混合溶液中含有有机溶剂,要选用脂(F)滤膜。